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更新時(shí)間:2025-12-08
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一、GoldBio熒光素鉀鹽核心概述
GoldBio的熒光素鉀鹽,是螢光素酶的天然底物。在ATP和氧氣的存在下,螢光素酶會(huì)催化熒光素發(fā)生氧化反應(yīng),產(chǎn)生生物發(fā)光信號(hào)(發(fā)出波長(zhǎng)為560nm左右的黃綠色光)。
二、GoldBio熒光素鉀鹽如何使用(標(biāo)準(zhǔn)流程簡(jiǎn)述)
通常需要將其配制成工作液。一個(gè)常見(jiàn)的體外檢測(cè)配方如下:
1. 配制儲(chǔ)存液(如100mM):
稱取適量熒光素鉀鹽粉末,溶于pH 7.8左右的緩沖液(如 Tris、HEPES)或無(wú)菌水中。
過(guò)濾除菌,分裝避光保存于-20°C或-80°C。
2. 配制工作液(1X):
使用前,將儲(chǔ)存液用檢測(cè)緩沖液稀釋至所需濃度(通常為0.1-1mM)。
工作液中通常還需加入輔酶A,以穩(wěn)定發(fā)光信號(hào),獲得持續(xù)的“輝光型”發(fā)光而非一閃而過(guò)的“閃光型”。
3. 檢測(cè):
對(duì)于細(xì)胞:棄去培養(yǎng)液,加入工作液,裂解細(xì)胞并混勻后,立即用酶標(biāo)儀(化學(xué)發(fā)光模塊)或發(fā)光計(jì)檢測(cè)。
對(duì)于動(dòng)物:腹腔注射一定劑量(如150mg/kg)的熒光素鉀鹽(溶于PBS),等待約10-15分鐘讓其在體內(nèi)分布均勻后,進(jìn)行成像。
三、GoldBio熒光素鉀鹽優(yōu)勢(shì)與注意事項(xiàng)
優(yōu)勢(shì):
性價(jià)比高:相比許多品牌的預(yù)混檢測(cè)試劑盒,自行購(gòu)買(mǎi)粉末配制成本更低,尤其適合大批量實(shí)驗(yàn)。
靈活性高:可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求自行優(yōu)化工作液的配方(如緩沖液pH、離子強(qiáng)度、添加輔酶A等)。
水溶性好:鉀鹽形式解決了溶解難題。
四、GoldBio熒光素鉀鹽注意事項(xiàng)
1. 避光保存:熒光素對(duì)光敏感,粉末和溶液均應(yīng)避光保存,以防降解。
2. 無(wú)菌操作:用于體內(nèi)注射時(shí),溶液必須經(jīng)過(guò)無(wú)菌過(guò)濾(0.22μm濾膜),并確保無(wú)熱原。
3. pH敏感性:螢光素酶反應(yīng)的最適pH約為7.8,緩沖液pH至關(guān)重要。
4. 體內(nèi)注射濃度:需根據(jù)動(dòng)物模型和成像系統(tǒng)優(yōu)化注射劑量和成像時(shí)間。
五、總結(jié)與選購(gòu)建議
GoldBio的熒光素鉀鹽是一款可靠、經(jīng)濟(jì)的基礎(chǔ)性發(fā)光底物。
如果您需要:自行建立或大量進(jìn)行螢光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)、ATP檢測(cè),或?yàn)榛铙w成像配制注射劑,那么購(gòu)買(mǎi)GoldBio的熒光素鉀鹽粉末自行配制,是具成本效益的選擇。
如果您需要:進(jìn)行少量、便捷的常規(guī)報(bào)告基因檢測(cè),且對(duì)操作便捷性要求高,那么直接購(gòu)買(mǎi)預(yù)混好的“輝光型”螢光素酶檢測(cè)試劑盒(如Promega, Beyotime等)可能更節(jié)省時(shí)間和保證結(jié)果穩(wěn)定性。
簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō),GoldBio熒光素鉀鹽是“原材料”,適合動(dòng)手配制和優(yōu)化體系的用戶;而試劑盒是“即食餐”,適合追求標(biāo)準(zhǔn)化和快速流程的用戶。
GoldBio,Promega, Beyotime代理——天津益元利康生物科技有限公司,歡迎咨詢選購(gòu)。
益元利康有限公司是一家專注于生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室快速消耗品為主營(yíng)方向的生命科技企業(yè),提供完整的產(chǎn)品和服務(wù)體系,為廣大的科研用戶提供實(shí)驗(yàn)室一站式服務(wù)。益元利康已成為多家生物品牌的代理商,如ALZET、MedKoo、EZB、WaKo、Zymo research、Qiagen等,為用戶提供完善的產(chǎn)品、專業(yè)的咨詢,助力推動(dòng)中國(guó)生命科學(xué)研究快速發(fā)展。
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